貨號
產(chǎn)品規(guī)格
售價
備注
BN21015-100ml
100ml
¥150.00
BN21015-500ml
500ml
¥600.00
產(chǎn)品描述
保存:
2-8℃,一年有效。
產(chǎn)品簡介:
使用膜再生液可以對同一張膜進行多次 Western Blot 檢測。在室溫條件下,將用過的膜浸泡在膜再生液 10-60 分鐘,可在不影響抗原蛋白的情況下清除膜上結(jié)合的抗體。隨后,可以使用不同的抗體進行下一輪 Western Blot 實驗。適宜從少量樣品多次檢測不同蛋白質(zhì)。即使樣品量并不匱乏,采用這一策略多次檢測同一張膜上的蛋白, 能省去給藥處理、蛋白電泳和膜轉(zhuǎn)移等耗費性步驟。而且可以消除重新上樣而帶來的誤差,使可比性更強。
Western Blot 膜再生液特點是:無毒無味無害,室溫下使用,室溫下保存;可對同一張膜進行 5 次以上的 Western Blot 檢測。
適用:清除硝酸纖維素膜或 PVDF 膜上結(jié)合的抗體,不影響抗原蛋白。
使用方法:
1. 將膜充分浸泡于適當體積的再生液中,室溫洗脫 10-20 分鐘,時間長短應該參考注意事項進行優(yōu)化,洗脫 某些抗體需較長時間,更有長達 60 分鐘之久,如果室溫洗脫效果不好,可將膜再生液加熱至 50 度,在 50 度水浴 條件下進行洗脫。
2. 取出膜,用洗滌液(如 TBST 等)漂洗兩次。
3. 此時膜上抗體已除去,可重新封閉后再加入另一種抗體進行檢測。
注意事項:
1. 膜再生液實質(zhì)是在不影響膜上結(jié)合的抗原的條件下將抗體洗脫下來,實際操作中,膜類型、抗體類型、濃 度及抗原特性都影響洗脫難易度。
2. 適用于ECL 和類似的化學發(fā)光試劑進行的Western檢測。不適用于非化學發(fā)光試劑進行的Western檢測,例 如 DAB,NBT/BCIP。
3. 用 ECL顯色后,再生液洗脫幾分鐘后,可再次加入 ECL顯色液顯影,如膠片上顯示條帶,表明抗體未除 凈,須進一步在再生液中浸泡,至膠片上無顯色。
4. 使用脫脂奶粉封閉的膜要比使用 BSA 封閉的膜更容易再生。
5. 盡量避免讓膜干燥。